二磺酸酚光度法適合檢測飲用水、地下水和清潔地表水等，這類水質(zhì)相對(duì)干凈的硝酸鹽氮含量。其檢測原理是硝酸鹽在無水的情況下與酚二磺酸反應(yīng)，生成硝基二磺酸酚，在堿性溶液中生成黃色化合物，然后進(jìn)行測定。不過需要注意的是水中含有的氯化物、亞硝酸鹽、銨鹽、有機(jī)物和碳酸鹽會(huì)對(duì)檢測結(jié)果造成干擾，因此要對(duì)其進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理。

二磺酸酚光度法所需儀器及試劑

1.分光光度計(jì)
2.瓷蒸發(fā)皿
3.發(fā)煙硫酸
4.濃硫酸
5.酚二磺酸
稱取25g苯酚置于500mL錐形瓶中,加150mL濃硫酸使之溶解,再加75mL發(fā)煙硫酸(含13%三氧化硫),充分混合。瓶口插小漏斗,小心置瓶于沸水浴中加熱2h,得淡棕色稠液,貯于棕色瓶中,密塞保存。
6.氨水
7.硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液
稱取0.7218g經(jīng)105-110℃干燥2h的優(yōu)級(jí)純硝酸鉀溶于三級(jí)試劑水，移入1000mL容量瓶中，稀釋至標(biāo)線，加2mL三氯甲烷作保存劑，混勻后至少可穩(wěn)定6個(gè)月。
8.硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液
吸取50.0mL硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備液置蒸發(fā)皿內(nèi),加0.1mol/L氫氧化鈉溶液使調(diào)至pH=8,在水浴上蒸發(fā)至干。加2mL酚二磺酸,用玻璃棒研磨蒸發(fā)皿內(nèi)壁,使殘?jiān)c試劑充分接觸,放置片刻,重復(fù)研磨一次,放置10min,加入少量三級(jí)試劑水,移入500mL容量瓶中,稀釋至標(biāo)線,混勻。貯于棕色瓶中,此溶液至少穩(wěn)定6個(gè)月。
9.硫酸銀溶液
稱取4.397g硫酸銀溶于三級(jí)試劑水,移至1000mL容量瓶中,用三級(jí)試劑水稀釋至標(biāo)線。1.00mL此溶液可去除1.00mg氯離子(C1-)。
10.氫氧化鋁懸浮液
溶解125g硫酸鋁鉀或硫酸鋁銨于1000mL三級(jí)試劑水中,加熱至60℃,在不斷攪拌下,徐徐加入55mL濃氨水,放置約1h后,移1000nL量筒內(nèi),用三級(jí)試劑水反復(fù)洗滌沉淀,最后至洗滌液中不含硝酸鹽為止。澄清后,把上清液盡量全部傾出,只留稠的懸浮物,最后加入100mL三級(jí)試劑水,使用前應(yīng)振蕩均勻。
11.高錳酸鉀溶液
稱取3.16g高錳酸鉀溶于三級(jí)試劑水,稀釋至1L。

硝酸鹽氮檢測步驟

1.校準(zhǔn)曲線的繪制

于一組50mL比色管中,分別硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液配制表給的標(biāo)準(zhǔn)溶液量用分度吸管分別加入硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液,加三級(jí)試劑水至約40mL。加3mL氨水使成堿性稀釋至標(biāo)線,混勻。在波長410nm處,以三級(jí)試劑水為參比,符合下圖硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液1的用30mm比色皿測量吸光度,硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液2的用10mm比色皿測量吸光度。由測得的吸光度值減去零濃度管的吸光度值,分別繪制不同比色皿光程長的吸光度對(duì)硝酸鹽氮含量(mg)的校準(zhǔn)曲線。

2.水樣預(yù)處理

（1）水樣渾濁帶顏色
可取100mL水樣與具塞比色管中，加入2mL氫氧化鋁懸浮液，密塞震搖，靜置數(shù)分鐘后，過濾棄去20mL初濾液。
（2）去除水中氯離子
取100mL水樣移入具塞比色管中,根據(jù)已測定的氯離子含量,加入相當(dāng)量的硫酸銀溶液,充分混合。在暗處放置0.5h,使氯化銀沉淀凝聚然后用慢速濾紙過濾,棄去20mL初濾液。
3.水樣測定
取50.0mL經(jīng)預(yù)處理的水樣于蒸發(fā)皿中,用pH試紙檢查,必要時(shí)用0.5mol/L硫酸或0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)至約pH=8,置水浴上蒸發(fā)至干。加1.omL酚二磺酸,用玻璃棒研磨,使試劑與蒸發(fā)皿內(nèi)殘?jiān)浞纸佑|,靜置片刻,再研磨一次,放置10min,加入約10mL三級(jí)試劑水。在攪拌下加入3-4mL氨水,使溶液呈現(xiàn)最深的顏色。如有沉淀,則過濾。將溶液移入50mL比色管中,稀釋至標(biāo)線,混勻。于波長410nm處,根據(jù)硝酸鹽氮含量選用10mm或30mm比色皿,以三級(jí)試劑水為參比,測量吸光度。同時(shí)以三級(jí)試劑水代替水樣,按相同步驟進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn)。然后通過公式算出水樣中硝酸鹽氮的含量。

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